學習實驗操作原理並不是靠背誦的,而是靠對欲提取物質特性的認識,及對不同不同化學品或物理操作的認識,從而推論出來的。
以下是一些需要考慮的準則:
1. 提取物質的特性?
- 溶於甚麼溶劑(水 / 有機溶劑)?
- 是否帶電荷?
2. 提取的物質與其他甚麼物質更易結合
3. 欲提取的物質外圍有甚麼物質包著?
根據以上的準則,試提出從細胞中抽取DNA的基本方法。
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DNA本身特性 |
提取方法 |
原理 |
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帶負電荷(因含有磷酸) |
加入正電荷離子 |
DNA更易聚集在一起 |
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溶於水而不溶於酒精 |
加入酒精 |
DNA不溶於酒精,才能於酒精介質中分離出來 |
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DNA與蛋白質纏繞在一起形成染色體 |
加入蛋白酶 |
分解染色體上的蛋白質,使提取出的DNA更純淨 |
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DNA外圍的物質 |
提取方法 |
原理 |
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真核細胞的DNA位於核膜內,核膜主要由磷脂組成 |
加入乳化劑 / 有機溶劑 |
磷脂會溶於有機溶劑/乳化劑,核膜會被破壞,方便提取DNA |
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真核細胞外層是細胞膜,主要由磷脂組成 |
加入乳化劑 / 有機溶劑 |
磷脂會溶於有機溶劑/乳化劑,核膜會被破壞,方便提取DNA |
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如是植物細胞的話,最外層有細胞壁 |
機械式把細胞壁磨爛 |
DNA屬大分子,無法經細胞壁內間隙,破壞細胞壁才能提取DNA |
重要提示:
以上的操作祇是原理,不是具體的步驟。DNA於不同的有機溶劑的溶解度不同。要提取最純淨的DNA,需要仔細的操作及不斷嘗試及比較不同的操作方法。